致畸試驗(yàn)?zāi)康模褐禄囼?yàn)是鑒定化學(xué)物質(zhì)是否具有致畸性的一種方法。通過致畸試驗(yàn),一 方面鑒定化學(xué)物質(zhì)有無致畸性,另一方 面確定其胚胎毒作用,為化學(xué)物質(zhì)在化妝品中安全使用提供依據(jù)。
定義:胚胎發(fā)育過程中,接觸了某種有害物質(zhì)影響器官的分化和發(fā)育,導(dǎo)致形態(tài)和機(jī)能的缺陷,出現(xiàn)胎兒畸形,這種現(xiàn)象稱為致畸作用。引起胎兒畸彤的物質(zhì)稱為致畸原。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇:常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是小白鼠,大白鼠和兔,大、小白鼠為*動(dòng)物。選用健康性成熟大鼠90~100天齡,雌性應(yīng)足初產(chǎn)的。
劑量和分組:至少設(shè)4組,其中三組給藥組和一組空白對(duì)照組。每組至少12只孕鼠。初次進(jìn)行致畸試驗(yàn)或引入新的動(dòng)物種株時(shí),需要設(shè)陽性對(duì)照組。常用陽性對(duì)照物有敵枯雙、五氯酚鈉、維生素A等等。根據(jù)受試物的動(dòng)物半數(shù)致死量(LD50)和備積性的大小,確定受試驗(yàn)的給藥劑量,應(yīng)該包括無作用劑量組,有致畸作用劑量組和明顯致畸劑量組。
“孕鼠”的檢出和給藥時(shí)間
雌鼠和雄鼠按1:1(或2:1)同籠,每日晨觀察陰栓(或陰道涂片),查出陰栓(或精子)的當(dāng)天定為孕期零天。如果五天內(nèi)沒查出“受精鼠”,應(yīng)調(diào)換雌鼠。檢出的“受精鼠”按隨機(jī)分組,稱重和編號(hào)。在大鼠孕期6~15天期間,每天灌胃給藥。
孕鼠于孕期0日、6日、10日、15日和20日稱平,并根據(jù)體重調(diào)整給藥量。保持動(dòng)物室內(nèi)環(huán)境安靜,室溫控制在20度個(gè)25度為宜,適當(dāng)?shù)亟o孕鼠增加營(yíng)養(yǎng),如加麥芽或蛋糕等。
第20天孕大鼠用20%硫責(zé)妥鈉1~1.5ml腹腔注射麻醉斷頭處死。剖腹腔檢查卵巢內(nèi)黃體數(shù),取出子宮,稱重,檢查活胎、早期吸收和遲死胎數(shù)目。
逐個(gè)記錄活胎鼠體重,性別,體長(zhǎng)。外觀檢查頭顱外形、面部、軀干、四肢等有無畸形,包括:露腦、腦膨出、眼部畸形(小眼、無眼、睜眼等鼻孔擴(kuò)大,單鼻孔、唇裂、脊柱裂、四肢擴(kuò)尾畸形等等。
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